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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Universidad Nacional Mayor de San Marcos
2007
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=195018597018 |
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Table of Contents:
- Aplicación de dos biomarcadores para el análisis de lesiones en el DNA de bivalvos marinos Giovanna Sotil Rafael Alvis Juan C. Francia Betty Shiga Biología estrés bivalvos micronúcleo daño del DNA Ensayo Cometa alcalino El presente trabajo describe la estandarización de las técnicas del Test de Micronúcleo (MN) y Ensayo Cometa para la evaluación del daño en el DNA de bivalvos marinos. La importancia de estas técnicas radica en que permiten evaluar la respuesta temprana al estrés ocasionado por agentes contaminantes y cambios ambientales. Tejidos branquiales de Semimytilus algosus y Aulacomya ater fueron utilizados para tratamientos in vivo e in vitro. Los tejidos fueron expuestos a los agentes mutagénicos Mitomicina C en concentraciones de 0,02; 0,04 y 0,06 x 10-6 M y H2O2 en una concentración de 100 ¿M con tiempos de evaluación de 1, 3, 6, 24 y 48 h. Diferentes soluciones para la colecta del tejido y aislamiento celular fueron evaluados obteniendo una mayor viabilidad celular en la solución salina CMFS, pH 7,3; en frío. El Test de Micronúcleo se modificó en la forma de obtener el disgregado celular, realizando la hipotonización en Citrato de sodio 0,9%, fijación en metanol por segundos posterior al frotis y la tinción con Giemsa 2%. La estandarización del Ensayo Cometa Alcalino, descrita por Wilson et al. (1998), se realizó modificando la suspensión celular en agarosa LMP (1% en solución Kenny, pH 7,5), la exposición a solución de lisis (pH 10 con DMSO y Tritón) con variaciones en el tiempo de 1 a 16 h, y la electroforesis en solución alcalina pH 13,7 y tinción con Bromuro de etidio y Nitrato de plata para geles de agarosa. Los cambios realizados en ambas técnicas permitieron obtener un alto número celular con morfología definida, observándose macrolesiones como la formación de MN y aberraciones nucleares, y la determinación cualitativa de microlesiones observadas por fragmentación y migración del DNA. 2007 artículo científico 1561-0837 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=195018597018 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=1950 Revista Peruana de Biología application/pdf Universidad Nacional Mayor de San Marcos Revista Peruana de Biología (Perú) Num.3 Vol.13