CLONAJE Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR IN SILICO DE UN TRANSCRITO DE FOSFOLIPASA A2 AISLADO DEL VENENO DE LA SERPIENTE PERUANA Lachesis muta

Fuente: Redalyc
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Autor principal: Karim L. Jimenez
Formato: Artículo científico
Lenguaje:es
Publicado: Instituto Nacional de Salud 2010
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author Karim L. Jimenez
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contents CLONAJE Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR IN SILICO DE UN TRANSCRITO DE FOSFOLIPASA A2 AISLADO DEL VENENO DE LA SERPIENTE PERUANA Lachesis muta Karim L. Jimenez Amparo I. Zavaleta Victor Izaguirre Armando Yarleque Rosio R. Inga Salud Lachesis muta Fosfolipasas A2 Clonación molecular Venenos de serpiente Biología computacional (fuente: DeCS BIREME) Objetivo. Aislar y caracterizar in silico un transcrito del gen de fosfolipasa A2 (PLA2) aislado del veneno de Lachesis muta de la Amazonía peruana. Materiales y métodos. Se amplificó el transcrito del gen sPLA2 mediante la técnica de RT-PCR a partir de RNA total utilizando cebadores específicos, el producto de DNA amplificado se insertó en el vector pGEM para su posterior secuenciación. Mediante análisis bioinformático de la secuencia nucleotídica se determinó un marco de lectura abierta de 414 nucleótidos que codifica 138 aminoácidos, incluyendo16 aminoácidos del péptido señal, el peso molecular y el pI fueron de 13 976 kDa y 5,66 respectivamente. Resultados. La secuencia aminoacídica denominada Lm-PLA2- Perú, contiene Asp49, así como Tyr-28, Gly-30, Gly-32, His-48, Tyr52, Asp99 importantes para la actividad enzimática. La comparación de Lm-PLA2-Perú con las secuencias aminoacídicas de los bancos de datos mostró 93% de similitud con las sPLA2 de Lachesis stenophrys y más del 80% con otras sPLA2 de venenos de la familia Viperidae. El análisis filogenético de la secuencia nucleotídica del transcrito del gen sPLA2 indica que Lm-PLA2-Perú se agrupa con otras sPLA2 [Asp49] ácidas previamente aisladas del veneno de Bothriechis schlegelii con un 89% de identidad. El modelaje tridimensional de Lm-PLA2-Perú, presenta una estructura característica de sPLA2 del Grupo II formada por tres hélices-a, una lámina-B, una hélice corta y un lazo de unión con calcio. Conclusión. La secuencia nucleotídica corresponde al primer transcripto del gen de PLA2 clonado a partir del veneno de la serpiente Lachesis muta, que habita en la selva del Perú. 2010 artículo científico 1726-4642 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=36318511007 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=363 Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública application/pdf Instituto Nacional de Salud Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública (Perú) Num.4 Vol.27
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CLONAJE Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR IN SILICO DE UN TRANSCRITO DE FOSFOLIPASA A2 AISLADO DEL VENENO DE LA SERPIENTE PERUANA Lachesis muta Karim L. Jimenez Amparo I. Zavaleta Victor Izaguirre Armando Yarleque Rosio R. Inga Salud Lachesis muta Fosfolipasas A2 Clonación molecular Venenos de serpiente Biología computacional (fuente: DeCS BIREME) Objetivo. Aislar y caracterizar in silico un transcrito del gen de fosfolipasa A2 (PLA2) aislado del veneno de Lachesis muta de la Amazonía peruana. Materiales y métodos. Se amplificó el transcrito del gen sPLA2 mediante la técnica de RT-PCR a partir de RNA total utilizando cebadores específicos, el producto de DNA amplificado se insertó en el vector pGEM para su posterior secuenciación. Mediante análisis bioinformático de la secuencia nucleotídica se determinó un marco de lectura abierta de 414 nucleótidos que codifica 138 aminoácidos, incluyendo16 aminoácidos del péptido señal, el peso molecular y el pI fueron de 13 976 kDa y 5,66 respectivamente. Resultados. La secuencia aminoacídica denominada Lm-PLA2- Perú, contiene Asp49, así como Tyr-28, Gly-30, Gly-32, His-48, Tyr52, Asp99 importantes para la actividad enzimática. La comparación de Lm-PLA2-Perú con las secuencias aminoacídicas de los bancos de datos mostró 93% de similitud con las sPLA2 de Lachesis stenophrys y más del 80% con otras sPLA2 de venenos de la familia Viperidae. El análisis filogenético de la secuencia nucleotídica del transcrito del gen sPLA2 indica que Lm-PLA2-Perú se agrupa con otras sPLA2 [Asp49] ácidas previamente aisladas del veneno de Bothriechis schlegelii con un 89% de identidad. El modelaje tridimensional de Lm-PLA2-Perú, presenta una estructura característica de sPLA2 del Grupo II formada por tres hélices-a, una lámina-B, una hélice corta y un lazo de unión con calcio. Conclusión. La secuencia nucleotídica corresponde al primer transcripto del gen de PLA2 clonado a partir del veneno de la serpiente Lachesis muta, que habita en la selva del Perú. 2010 artículo científico 1726-4642 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=36318511007 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=363 Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública application/pdf Instituto Nacional de Salud Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública (Perú) Num.4 Vol.27
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