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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Instituto Nacional de Salud
2015
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=36338592003 |
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| _version_ | 1866817086911676416 |
|---|---|
| author | Mariela Pérez Dominguez |
| author_facet | Mariela Pérez Dominguez |
| contents | TRADUCCIÓN INDEPENDIENTE DE LA ESTRUCTURA 5 ́cap DEL ARN GENÓMICO DEL VIRUS DENGUE Mariela Pérez Dominguez Roselbis Rojas Eduardo Bandeira Dayana Requena Ana C. Ferreras Juana L. Triana Francisco Triana-Alonso Salud Virus del dengue Virus del dengue Biosíntesis de Proteínas Biosíntesis de Proteínas oligonucleótidos antisentido (fuente: DeCS BIREME) Objetivos. Analizar la participación de la caperuza metil-guanosín-trifosfato (5 ́cap) y de la región inicial del ARN genó-mico del virus dengue serotipo 2 (DENV-2) genotipo Americano en la traducción, utilizando un sistema libre de células obtenido de placenta humana. Materiales y métodos. Se preparó el plásmido recombinante pTZ18R-D2 conteniendo el ADN que codifica la 5 ́UTR y los primeros 201 nucleótidos de la cápside viral. Este plásmido se utilizó para transcri-bir el ARN correspondiente (ARN-D2), sin la 5 ́cap. El ARN-D2 fue traducido en un sistema constituido por la fracción posmitocondrial (S-30) de placenta humana y se evaluó la incorporación de [14C] aminoácidos en presencia del ARN-D2 y en su ausencia (control). Se diseñaron siete oligonucleótidos antisentido (OAs1-7) dirigidos contra secuencias de las estructuras SLA, SLB y cHP del ARN-D2 y se analizó el efecto de los mismos sobre la traducción ARN-D2. Resultados.El ARN-D2 produjo un incremento significativo (p<0,001) en la incorporación de [14C] aminoácidos, con estimulación del 75% de la actividad traduccional respecto al control. El análisis de los productos de traducción mostró un pico de incorporación correspondiente a péptidos con peso molecular aparente cercano al esperado (7,746 kDa). El OAs5, com-plementario a una secuencia de la estructura SLB del ARN-D2, inhibió completamente la traducción. Conclusiones.El ARN-D2 fue traducido de manera específica y eficiente, bajo condiciones semejantes a las intracelulares en humanos, por un mecanismo alternativo independiente de la 5 ́cap, que involucraría a la estructura SLB. Este mecanismo podría considerarse como blanco en el desarrollo de terapias antisentido para inhibir la reproducción del virus. 2015 artículo científico 1726-4642 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=36338592003 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=363 Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública application/pdf Instituto Nacional de Salud Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública (Perú) Num.1 Vol.32 |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_36338592003 |
| language | es |
| publishDate | 2015 |
| publisher | Instituto Nacional de Salud |
| spellingShingle | TRADUCCIÓN INDEPENDIENTE DE LA ESTRUCTURA 5 ́cap DEL ARN GENÓMICO DEL VIRUS DENGUE Mariela Pérez Dominguez Salud Virus del dengue Virus del dengue Biosíntesis de Proteínas Biosíntesis de Proteínas oligonucleótidos antisentido (fuente: DeCS BIREME) TRADUCCIÓN INDEPENDIENTE DE LA ESTRUCTURA 5 ́cap DEL ARN GENÓMICO DEL VIRUS DENGUE Mariela Pérez Dominguez Roselbis Rojas Eduardo Bandeira Dayana Requena Ana C. Ferreras Juana L. Triana Francisco Triana-Alonso Salud Virus del dengue Virus del dengue Biosíntesis de Proteínas Biosíntesis de Proteínas oligonucleótidos antisentido (fuente: DeCS BIREME) Objetivos. Analizar la participación de la caperuza metil-guanosín-trifosfato (5 ́cap) y de la región inicial del ARN genó-mico del virus dengue serotipo 2 (DENV-2) genotipo Americano en la traducción, utilizando un sistema libre de células obtenido de placenta humana. Materiales y métodos. Se preparó el plásmido recombinante pTZ18R-D2 conteniendo el ADN que codifica la 5 ́UTR y los primeros 201 nucleótidos de la cápside viral. Este plásmido se utilizó para transcri-bir el ARN correspondiente (ARN-D2), sin la 5 ́cap. El ARN-D2 fue traducido en un sistema constituido por la fracción posmitocondrial (S-30) de placenta humana y se evaluó la incorporación de [14C] aminoácidos en presencia del ARN-D2 y en su ausencia (control). Se diseñaron siete oligonucleótidos antisentido (OAs1-7) dirigidos contra secuencias de las estructuras SLA, SLB y cHP del ARN-D2 y se analizó el efecto de los mismos sobre la traducción ARN-D2. Resultados.El ARN-D2 produjo un incremento significativo (p<0,001) en la incorporación de [14C] aminoácidos, con estimulación del 75% de la actividad traduccional respecto al control. El análisis de los productos de traducción mostró un pico de incorporación correspondiente a péptidos con peso molecular aparente cercano al esperado (7,746 kDa). El OAs5, com-plementario a una secuencia de la estructura SLB del ARN-D2, inhibió completamente la traducción. Conclusiones.El ARN-D2 fue traducido de manera específica y eficiente, bajo condiciones semejantes a las intracelulares en humanos, por un mecanismo alternativo independiente de la 5 ́cap, que involucraría a la estructura SLB. Este mecanismo podría considerarse como blanco en el desarrollo de terapias antisentido para inhibir la reproducción del virus. 2015 artículo científico 1726-4642 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=36338592003 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=363 Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública application/pdf Instituto Nacional de Salud Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública (Perú) Num.1 Vol.32 |
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