Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Sprache: | es |
| Veröffentlicht: |
Universidad Nacional Mayor de San Marcos
2014
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=371834048004 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
Inhaltsangabe:
- Evaluación de Cuatro Tiempos de Cultivo sobre la Tasa de Maduración y División Posfecundación in vitro de Ovocitos de Alpaca Wilfredo Huanca L. Rosario Condori P. María Chileno Chileno M. Pedro García H. Juan Cainzo C. Juan J. Becerra G. Veterinaria alpacas ovocitos maduración Fecundaciónin vitro Se evaluó el efecto del tiempo de cultivo sobre la tasa de maduración nuclear y tasade división posfecundación a 72 horas de ovocitos de alpacas. Complejos Cumulus-Ovocitos (CCOs) fueron obtenidos de ovarios procedentes de animales beneficiados enel camal y transportados a 35 °C en solución salina 0.9% suplementada con antibióticoantimicótico. Los CCOs fueron aspirados de folículos de 2 a 6 mm.Experimento1: 502ovocitos fueron distribuidos en cuatro tiempos de maduración (30, 34, 38 y 42 horas) ymadurados en TCM-199 suplementado con 10% suero fetal bovino (SFB), 0.5μg/mL deFSH, 10μg/mL de hCG, 0.2mM de piruvato de sodio, 50μg/mL de gentamicina y 1μg/mLde E2, y cultivados a 39 ºC bajo una atmósfera de 5% de CO2y alta humedad. Posterior-mente, los ovocitos fueron removidos, lavados con PBS suplementado con 10% de SFBy 1 mg/ml de hialuronidasa y fijados en solución de etanol y ácido acético (3:1). Losovocitos fueron colocados en portaobjetos, teñidos con 1% de orceína y examinadosbajo un microscopio a 400x para determinar la maduración nuclear.Experimento 2: 533ovocitos fueron cultivados bajo las mismas condiciones del experimento 1 y fecundadoscon espermatozoides obtenidos de epidídimos. Los espermatozoides fueron centrifugadosa 700gen una gradiente de Percoll discontinua (22.5:45%) por 25 minutos. El sobrenadantefue removido y el pellet (con espermatozoides viables) reconstituido con TL-Stock. Losgametos fueron co-cultivados por 18 horas a 39 ºC con 5% de CO2en KSOM suplemen-tado con 10% de SFB, 2 mM de piruvato de sodio y 50μg/mL gentamicina, y evaluados a las 72 horas. En el Experimento 1 se obtuvo el 26.3±5.4, 52.6±6.7, 68.5±10.6 y 75.3±11.9%de ovocitos en Metafase-II para 30, 34, 38 y 42 h de cultivo, respectivamente, con diferen-cia estadística entre 30 y 34 h respecto a 38 y 42 h (p<0.05). En el Experimento 2, la tasa dedivisión fue 9.5±4.8, 8.1±5.8, 15.6±9.2 y 19.8±8.0% para 30, 34, 38 y 42 h, sin diferenciaestadística entre grupos. Los resultados sugieren que los ovocitos de alpacas requierende 38 a 42 h de maduración para obtener estadios de Metafase-II. 2014 artículo científico 1682-3419 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=371834048004 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=3718 Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, RIVEP application/pdf Universidad Nacional Mayor de San Marcos Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, RIVEP (Perú) Num.4 Vol.25