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Estandarización de la Técnica de PCR para la Detección de ADN de Leishmania sp. en Muestras de Sangre de Caninos

Fuente: Redalyc

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Dettagli Bibliografici
Autore principale:	Jesús Reyes
Natura:	Artículo científico
Lingua:	es
Pubblicazione:	Universidad Central de Venezuela 2015
Soggetti:	Veterinaria PCR perro diagnóstico Leishmaniasis
Accesso online:	Acceder al recurso
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author	Jesús Reyes
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contents	Estandarización de la Técnica de PCR para la Detección de ADN de Leishmania sp. en Muestras de Sangre de Caninos Jesús Reyes Mercedes Viettri Angeline Rivas María Lares Leidi Herrera Cruz M. Aguilar Elizabeth Ferrer Veterinaria PCR perro diagnóstico Leishmaniasis La leishmaniasis es una enfermedad con diversidadclínica y epidemiológica, producida por variasespecies de protozoarios parásitos del géneroLeishmania. Estos parásitos infectan una ampliavariedad de hospedadores mamíferos y sontransmitidos por insectos del género Lutzomyia, ennuestro país. Los caninos han sido implicados comoposibles reservorios del parásito. Para el diagnósticode leishmaniasis se utilizan técnicas parasitológicasque generalmente tienen baja sensibilidad einmunológicas, con pobre especificidad. Debidoa las limitaciones en el diagnóstico, y lo difícil dela obtención, transporte y almacenamiento de lasmuestras, en este trabajo se planteó estandarizar deuna técnica de PCR anidada (Leishmania nestedPCR, Ln-PCR) para la detección de ADN deLeishmania sp. en muestras de sangre de caninoscolectadas en papel de filtro. Para ello se titularonlas concentraciones de reactivos de la PCR para laamplificación del ADN del parásito y se determinóla sensibilidad analítica y la especificidad de latécnica. Se evaluaron 36 muestras de sangre de caninos (6 infectados y 30 no infectados). Lascondiciones óptimas de reacción fueron 0,2 mMde dNTPs, 0,4 μM de cada cebador y 1 U de Taqpolimerasa. La sensibilidad analítica de Ln-PCRfue de 10 fg y la especificidad fue de 100% en ladetección de ADN de Leishmania sp., ya que no seobservó amplificación con ADN de otros parásitos, nicon ADN humano, ni de perro. De las muestras decaninos evaluadas los seis controles infectados todosamplificaron por la PCR, mientras que los 30 noinfectados, en ninguno se observó amplificación. Laextracción de ADN de muestras de sangre colectadasen papel de filtro fue eficiente para la amplificaciónpor la PCR, técnica que puede ser muy útil parael diagnóstico de leishmaniasis en animales y suimplicación como posibles reservorios. 2015 artículo científico 0258-6576 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=373143367002 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=3731 Revista de la Facultad de Ciencias Veterinarias, UCV application/pdf Universidad Central de Venezuela Revista de la Facultad de Ciencias Veterinarias, UCV (República Bolivariana de Venezuela) Num.2 Vol.56
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