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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Universidad de Carabobo
2007
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=375938985010 |
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Table of Contents:
- Actividad ATP hidrolasa asociada a ribosomas humanos como nuevo indicador para evaluar fármacos in vitro. Eduardo Bandeira Ana C. Ferreras Denys Bacilio Gabriel Galvis Héctor Parada Edmundo Cayama Juana L. Triana Francisco Triana Alonso Medicina ATPasa Ribosomas antibióticos placenta humana Traducción in vitro En todos los ribosomas de mamíferos estudiados hasta el presente se ha identi fi cado una actividad ATP hidrolasa (ATPasa) asociada. Su papel en el mecanismo de síntesis de proteínas está siendo es- tudiado actualmente y existen evidencias de homología funcional con el factor de elongación 3 (EF3) de hongos. Para caracterizar la actividad ATPasa ribosomal humana, se aislaron ribosomas 80S de placenta humana y se estudiaron los parámetros cinéticos de dicha actividad. La velocidad de hidrólisis (0,50 ± 0,05 nmol Pi/A 260 80S/ min) a concentración fi siológica de ATP (3 mmol/L) y la constante de catálisis aparente (0,5 ± 0,1 s -1 ) están en el rango reportado para otros ribosomas eucarióticos. Los valores aparentes de V max (0,65 nmol Pi/A 260 80S/min) y K M (58 μ mol/L), determinados por análisis de Lineweaver-Burk, también son comparables a los reportados para ribosomas de otros mamíferos. El análisis de Eadie-Hofstee indicó la presencia de cooperatividad positiva, con un K M aparente de 15 μ mol/L para la forma más activa de la enzima. La ATPasa fue in- hibida por metavanadato (inhibidor de EF3), y por los antibióticos emetina (inhibidor de la translocación) y anisomicina (actúa sobre los sitios ribosomales A y E). Además, la actividad no fue afectada por antibióticos especí fi cos para otras funciones ribosomales en eu- cariotes ni tampoco por bloqueadores del ribosoma bacteriano. La sencillez y bajo costo del ensayo de actividad ATPasa ribosomal lo hacen ideal para el diseño de pruebas de alto rendimiento in vitro que harían posible tomar decisiones tempranas sobre el posible uso terapéutico en humanos de nuevos antibióticos o fungicidas. 2007 artículo científico 1316-7138 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=375938985010 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=3759 Salus application/pdf Universidad de Carabobo Salus (República Bolivariana de Venezuela) Num.3 Vol.11