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| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Sprache: | es |
| Veröffentlicht: |
Universidad de Carabobo
2012
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| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=375939022009 |
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Inhaltsangabe:
- Amplificación de la región 5 ́UTR-C del genoma de los cuatro serotipos de Virus Dengue Daria Elena Camacho Elizabeth Ferrer Juana Ledia Triana-Alonso Ana Celia Ferreras Héctor Graterol Guillermo Comach Francisco Triana-Alonso Medicina RT PCR dengue 5 ́UTR Virus dengue Las infecciones por virus Dengue (DENV) representan la enfermedad viral transmitida por mosquitos más importante en términos de morbi-mortalidad. El genoma de DENV es un ARN de cadena simple con dos regiones no traducibles (UTR, Untranslated Region ) en los extremos (5 ́UTR y 3 ́UTR) limitando un marco abierto de lectura (ORF, Open Reading Frame ). Las 5 ́UTR y 3 ́UTR son determinantes en los mecanismos de replicación y síntesis de proteínas virales, haciendo de los mismos blancos potenciales para comprobar regulación y/o inhibición de tales procesos mediante moléculas antivirales. El objetivo de la investigación fue amplificar la región 5 ́UTR-C ( Untranslated Region-Capsid ) del genoma de los cuatro serotipos de DENV luego de la optimización de la Transcripción Reversa acoplada a Reacción en Cadena de la Polimerasa (RT-PCR), la cual podría emplearse para evaluar procesos de traducción viral en sistemas eucariotas in vitro y su inhibición con potenciales antivirales. Se emplearon cepas de los distintos serotipos virales (DENV-1, DENV-2, DENV-3 y DENV-4) y se realizaron ensayos con diferentes concentraciones de los cebadores y de las enzimas Taq polimerasa y Transcriptasa Reversa. Los resultados indicaron que la mejor reacción se obtuvo con concentraciones de cebadores de 0,5 μM (DENV-1 y DENV-3), 1 μM (DENV-2) y 0,75 μM (DENV-4). Las enzimas empleadas mostraron alta eficiencia a la mínima cantidad evaluada (1,25 U). De acuerdo a las condiciones especificadas, se obtuvieron productos de la región 5 ́UTR-C con una reacción de RT-PCR robusta y confiable para la amplificación de estos productos. 2012 artículo científico 1316-7138 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=375939022009 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=3759 Salus application/pdf Universidad de Carabobo Salus (República Bolivariana de Venezuela) Num.3 Vol.16