Estandarización de la técnica de ELISA para el diagnóstico de Toxocariasis humana

Fuente: Redalyc
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Autor principal: Pilar Alva
Formato: Artículo científico
Lenguaje:es
Publicado: Universidad Nacional Mayor de San Marcos 2003
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author Pilar Alva
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contents Estandarización de la técnica de ELISA para el diagnóstico de Toxocariasis humana Pilar Alva Victoria Chávez Elizabeth Dávila Roxana Suárez César Náquira Pedro Huapaya Alina Huiza Carlos Sevilla Yrma Espinoza Medicina ELISA serología toxocariasis Toxocara canis OBJETIVO: Estandarizar la técnica ELISA para el diagnóstico de infección humana por Toxocaracanis con antígeno excretado-secretado preparado en nuestro medio. MATERIAL Y MÉTODOS: Secolectó huevos de T. canis y se les incubó con formol (2%) a 28oC hasta obtener larvas de tercerestadio, las que luego de ser liberadas fueron incubadas en RPMI a 37°C por 7 días; se reemplazó elmedio por otro similar y almacenó a -20°C. Se concentró el antígeno y se dosó proteínas. Para latécnica de ELISA se utilizó sueros de pacientes con toxocariasis y de niños recién nacidos, comocontroles positivos y negativos, respectivamente, diluidos desde ¼ hasta 1/1024. Se sensibilizó placasde poliestireno con varias concentraciones de antígeno, utilizándose conjugado de peroxidasa eIgG de carnero anti IgG humana y sustrato OPD. Se realizó lectura de absorbancia a 492 nm conespectrofotómetro (Multiskan plus labsystems), siendo el punto de corte el promedio aritmético de laabsorbancia de los sueros negativos más 3 desviaciones estándar. RESULTADOS: La concentraciónóptima del antígeno fue 50 ug/mL, la dilución del suero 1/128, la dilución del conjugado 1/1000 condensidad óptica mayor a 0,241. CONCLUSIONES: La técnica de ELISA para diagnóstico serológicode infección humana por Toxocara canis podría ser utilizada en estudios epidemiológicos en nuestropaís. Queda pendiente la evaluación de su eficacia en futuros estudios. 2003 artículo científico 1025-5583 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=37964102 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=379 Anales de la Facultad de Medicina application/pdf Universidad Nacional Mayor de San Marcos Anales de la Facultad de Medicina (Perú) Num.1 Vol.64
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Estandarización de la técnica de ELISA para el diagnóstico de Toxocariasis humana Pilar Alva Victoria Chávez Elizabeth Dávila Roxana Suárez César Náquira Pedro Huapaya Alina Huiza Carlos Sevilla Yrma Espinoza Medicina ELISA serología toxocariasis Toxocara canis OBJETIVO: Estandarizar la técnica ELISA para el diagnóstico de infección humana por Toxocaracanis con antígeno excretado-secretado preparado en nuestro medio. MATERIAL Y MÉTODOS: Secolectó huevos de T. canis y se les incubó con formol (2%) a 28oC hasta obtener larvas de tercerestadio, las que luego de ser liberadas fueron incubadas en RPMI a 37°C por 7 días; se reemplazó elmedio por otro similar y almacenó a -20°C. Se concentró el antígeno y se dosó proteínas. Para latécnica de ELISA se utilizó sueros de pacientes con toxocariasis y de niños recién nacidos, comocontroles positivos y negativos, respectivamente, diluidos desde ¼ hasta 1/1024. Se sensibilizó placasde poliestireno con varias concentraciones de antígeno, utilizándose conjugado de peroxidasa eIgG de carnero anti IgG humana y sustrato OPD. Se realizó lectura de absorbancia a 492 nm conespectrofotómetro (Multiskan plus labsystems), siendo el punto de corte el promedio aritmético de laabsorbancia de los sueros negativos más 3 desviaciones estándar. RESULTADOS: La concentraciónóptima del antígeno fue 50 ug/mL, la dilución del suero 1/128, la dilución del conjugado 1/1000 condensidad óptica mayor a 0,241. CONCLUSIONES: La técnica de ELISA para diagnóstico serológicode infección humana por Toxocara canis podría ser utilizada en estudios epidemiológicos en nuestropaís. Queda pendiente la evaluación de su eficacia en futuros estudios. 2003 artículo científico 1025-5583 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=37964102 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=379 Anales de la Facultad de Medicina application/pdf Universidad Nacional Mayor de San Marcos Anales de la Facultad de Medicina (Perú) Num.1 Vol.64
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