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| Autore principale: | |
|---|---|
| Natura: | Artículo científico |
| Lingua: | es |
| Pubblicazione: |
Universidad de Oriente
2007
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| Soggetti: | |
| Accesso online: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=443543706006 |
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Sommario:
- VALIDACIÓN DEL ENSAYO DE PROLIFERACIÓN CELULAR COLORIMÉTRICO POR MTT PARA LA DETERMINACIÓN DE POTENCIA DEL rHu-met-G-CSF N. Ledón Naranjo M. García Chaviano A. Portillo Vaquer E. Ruíz Castro Química Los factores estimuladores de colonias son cuatro glicoproteínas con función reguladora queintervienen en el control de la proliferación y diferenciación de las diferentes células maduras del troncode las células hematopoyéticas pluripotentes. Las notables ventajas que muestran los métodos colorimétricos(no radioactivos, simples, económicos, menos laboriosos y no tóxicos) con respecto a los que usan tímidinatritiada, contribuyeron a la elección de este método como alternativa analítica para la determinación dela actividad del G-CSF.El ensayo se basa en la medición del efecto proliferativo del rHu-met-G-CSF sobre el crecimientode las células G-NFS60. La cuantificación de la proliferación celular, se realiza mediante la medición dela absorbancia producida luego de la ruptura de la sal de tetrazolium (3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) por la enzima mitocondrial succinato-deshidrogenasa y que da lugar a unproducto coloreado (formazán).La conversión solo se realiza en células vivas y la cantidad de formazán producido es proporcionalal número de células vivas. El método se realiza según se describe en el PNO-5201 “Ensayo deproliferación celular colorimétrico por MTT para la determinación de potencia del rHu-met-G-CSF”.La optimización y validación del ensayo demostró que el método es exacto ya que no existendiferencias significativas entre los valores esperados y los reales según la prueba Chi cuadrado. En elrango de concentraciones entre 0.012 y 3.12 ng/mL el ensayo es lineal y paralelo para las curvas dosisrespuestade curvas y patrones. Este rango es exacto y preciso según los criterios de aceptaciónestablecidos. El ensayo es preciso, al obtenerse un coeficiente de variación de los ensayos de precisiónpor debajo de un 10 %. 2007 artículo científico 0258-5995 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=443543706006 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=4435 Revista Cubana de Química application/pdf Universidad de Oriente Revista Cubana de Química (Cuba) Num.1 Vol.XIX