Nuevo polimorfismo en el gen del canal del sodio de la garrapata Rhipicephalus microplus (Ixodida: Ixodidae) resistente a piretroides

Fuente: Redalyc
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1. Verfasser: Edgar Diaz-Rivera
Format: Artículo científico
Sprache:es
Veröffentlicht: Universidad de Costa Rica 2019
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author Edgar Diaz-Rivera
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contents Nuevo polimorfismo en el gen del canal del sodio de la garrapata Rhipicephalus microplus (Ixodida: Ixodidae) resistente a piretroides Edgar Diaz-Rivera Gisella Holguín Cespedes Daniel A. Urrea Montes Biología Garrapatas pesticidas mutaciones resistencia a químicos reacción en cadena de la polimerasa Para el control de Rhipicephalus microplus, garrapata común de los bovinos, se usan compuestos piretroides entre otros. El estudio de los mecanismos de resistencia hacia piretroides en esta garrapata ha demostrado la presencia de mutaciones en el gen del canal del sodio, sitio blanco del acaricida. El presente estudio tuvo como objetivo principal detectar el polimorfismo T2134A en el gen del canal del sodio que ha sido relacionado con resistencia a piretroides en individuos portadores. Para ello se recolectaron 182 garrapatas R. microplus en dos fincas con historial de resistencia a este tipo de acaricidas y se sometieron a una prueba de inmersión de hembras en una solución de cipermetrina preparada a la dosis recomendada para uso en campo, obteniendo seis individuos susceptibles, 92 resistentes y 84 medianamente resistentes. Se extrajo el ADN de todos los especímenes utilizando QIAamp DNA Mini Kit® y se procesó por PCR convencional empleando cebadores alelo específicos para amplificar un segmento del dominio IIIS6 del gen del canal del sodio. Los amplicones resultantes se detectaron por electroforesis en geles de agarosa al 2 % teñidos con GelRed® y se visualizaron con luz ultravioleta. De igual manera se efectuó el secuenciamiento de 20 muestras obtenidas en los tres fenotipos susceptible, medianamente resistente y resistente y las secuencias resultantes fueron alineadas mediante el programa Mega 7 y comparadas con secuencias almacenadas en el GenBank®. Los análisis mostraron que la población de R. microplus estudiada no presentaba la mutación esperada sino una mutación diferente en el sitio 2 134. Se observó la sustitución de una timina pero por una citosina, T2134C, que a la traducción genera el cambio de una fenilalanina por una leucina, a diferencia de la mutación previamente identificada, que genera el cambio de una fenilalanina por una isoleucina. Esto demuestra la presencia de un polimorfismo que no ha sido reportado en esta especie de garrapata y que generaría un nuevo marcador molecular de resistencia a piretroides para poblaciones de este ácaro. 2019 artículo científico 0034-7744 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=44965829019 https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/ https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/html/ https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/44965829019.epub https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/movil 10.15517/RBT.V67I4.35250 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=449 Revista de Biología Tropical application/pdf Universidad de Costa Rica Revista de Biología Tropical (Costa Rica) Num.4 Vol.67
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Edgar Diaz-Rivera
Biología
Garrapatas
pesticidas
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reacción en cadena de la polimerasa
Nuevo polimorfismo en el gen del canal del sodio de la garrapata Rhipicephalus microplus (Ixodida: Ixodidae) resistente a piretroides Edgar Diaz-Rivera Gisella Holguín Cespedes Daniel A. Urrea Montes Biología Garrapatas pesticidas mutaciones resistencia a químicos reacción en cadena de la polimerasa Para el control de Rhipicephalus microplus, garrapata común de los bovinos, se usan compuestos piretroides entre otros. El estudio de los mecanismos de resistencia hacia piretroides en esta garrapata ha demostrado la presencia de mutaciones en el gen del canal del sodio, sitio blanco del acaricida. El presente estudio tuvo como objetivo principal detectar el polimorfismo T2134A en el gen del canal del sodio que ha sido relacionado con resistencia a piretroides en individuos portadores. Para ello se recolectaron 182 garrapatas R. microplus en dos fincas con historial de resistencia a este tipo de acaricidas y se sometieron a una prueba de inmersión de hembras en una solución de cipermetrina preparada a la dosis recomendada para uso en campo, obteniendo seis individuos susceptibles, 92 resistentes y 84 medianamente resistentes. Se extrajo el ADN de todos los especímenes utilizando QIAamp DNA Mini Kit® y se procesó por PCR convencional empleando cebadores alelo específicos para amplificar un segmento del dominio IIIS6 del gen del canal del sodio. Los amplicones resultantes se detectaron por electroforesis en geles de agarosa al 2 % teñidos con GelRed® y se visualizaron con luz ultravioleta. De igual manera se efectuó el secuenciamiento de 20 muestras obtenidas en los tres fenotipos susceptible, medianamente resistente y resistente y las secuencias resultantes fueron alineadas mediante el programa Mega 7 y comparadas con secuencias almacenadas en el GenBank®. Los análisis mostraron que la población de R. microplus estudiada no presentaba la mutación esperada sino una mutación diferente en el sitio 2 134. Se observó la sustitución de una timina pero por una citosina, T2134C, que a la traducción genera el cambio de una fenilalanina por una leucina, a diferencia de la mutación previamente identificada, que genera el cambio de una fenilalanina por una isoleucina. Esto demuestra la presencia de un polimorfismo que no ha sido reportado en esta especie de garrapata y que generaría un nuevo marcador molecular de resistencia a piretroides para poblaciones de este ácaro. 2019 artículo científico 0034-7744 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=44965829019 https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/ https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/html/ https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/44965829019.epub https://www.redalyc.org/journal/449/44965829019/movil 10.15517/RBT.V67I4.35250 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=449 Revista de Biología Tropical application/pdf Universidad de Costa Rica Revista de Biología Tropical (Costa Rica) Num.4 Vol.67
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