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| Auteur principal: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Langue: | es |
| Publié: |
Universidad Autónoma de Baja California
2006
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| Sujets: | |
| Accès en ligne: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=48002106 |
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Table des matières:
- Purificación de la hormona luteinizante (LH) en la lubina (Dicentrarchus labrax) y desarrollo de un inmunoensayo específico J. Mateos E. Mañanós P. Swanson M. Carrillo S. Zanuy Ciencias de la Tierra peces lubina reproducción inmunoensayo hormona luteinizante La hormona luteinizante (LH), secretada por la glándula hipofisaria, regula los procesos de maduración gonadal, ovulación/espermiación y puesta en vertebrados. El presente trabajo describe la purificación de la LH de un pez teleósteo, la lubina europea(Dicentrarchus labrax), mediante triple cromatografía en columna (gel filtración, intercambio iónico y FPLC). Las subunidadesα y β de la LH se aislaron mediante rpHPLC. El peso molecular de la LH se estimó, mediante SDS-PAGE, en 31 kD y el de sussubunidades α y β en 12 y 22 kD, respectivamente. Se obtuvieron anticuerpos específicos contra la subunidad LHβ (AbLHβ),que fueron utilizados para desarrollar un inmunoensayo tipo ELISA. La sensibilidad del ELISA fue de unos 0.65 ng mL1 (Bi/Bo80%) y los coeficientes de variación intra e interensayo, de 11.7% (n = 8) y 11% (n = 10), respectivamente. La validación delensayo mostró paralelismo entre la curva patrón (LH) y muestras de plasma e hipófisis de lubina, así como con extractoshipofisiarios de otras especies de peces perciformes. Mediante ELISA, se analizaron los niveles plasmáticos de LH en lubinassometidas a tratamiento de inducción hormonal a la puesta, por inyección simple de diferentes dosis de GnRHa ([D-Ala6, Pro9-Net]-LHRH). Todos los tratamientos provocaron un marcado incremento de la LH plasmática a los 90 min después de lainyección, manteniéndose elevados durante 24 h. En conclusión, el ELISA puesto a punto es un inmunoensayo sensible ypreciso, apropiado para cuantificar LH en muestras biológicas de lubina y representa una valiosa herramienta para realizarestudios sobre la endocrinología de la reproducción de esta especie. 2006 artículo científico 0185-3880 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=48002106 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=480 Ciencias Marinas application/pdf Universidad Autónoma de Baja California Ciencias Marinas (México) Num.2 Vol.32