Extração de DNA genômico de tecidos foliares maduros de espécies nativas do cerrado
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Redalyc
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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | pt |
| Published: |
Universidade Federal de Viçosa
2010
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| Subjects: | |
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| _version_ | 1876486527212584960 |
|---|---|
| author | Márcia Nara da Silva |
| author_facet | Márcia Nara da Silva |
| contents | Extração de DNA genômico de tecidos foliares maduros de espécies nativas do cerrado Márcia Nara da Silva Agrociencias do campo) Anacardium humilis (caju Annona crassiflora (araticum) Eugenia dysenterica (cagaita) Grandes quantidades de contaminantes na amostra de DNA dificultam a obtenção de DNA genômico de qualidade durante a extração. A presença de polissacarídeos, fenóis e outros compostos secundários representa o principal problema com o procedimento de isolamento do DNA e sua aplicação subsequente, por inibir a atividade das enzimas Taq DNA polimera-se e enzimas de restrição. Neste estudo, descreveu-se um procedimento modificado baseado no hexadecyltrimethylammonium (CTAB), rendendo DNA genômico satisfatório para técnicas de manipulação subsequente, como reações de PCR e digestão com enzima de restrição. Nesse protocolo foram utilizadas diferentes concentrações de β-mercaptoetanol no tampão de extração (0,0; 0,2; 10; 15; 25; e 50 uL de β-mercaptoetanol/mL do tampão de extração: 100 mM de Tris-HCl, pH 8; 20 mM de EDTA; 1,4 mM de NaCl; 2% de CTAB; 1% de PVP), cujo procedimento foi aplicado no caso de folhas maduras e testado em Annona crassiflora (arati-cum), Eugenia dysenterica (cagaita), Anacardium humilis (caju-do-campo), Hancornia speciosa (mangaba) e Caryocar brasiliense (pequi). O protocolo foi eficiente no isolamento de DNA livre de polissacarídeos e polifenóis, com rendimento do DNA com alto peso molecu-lar, utilizando-se concentrações a partir de 1% de β-mercaptoetanol no tampão de extração. O DNA isolado por esse método mostrou alta pureza, de acordo com as análises de digestão por restrição e amplificação por PCR. 2010 artículo científico 0100-6762 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=48818716002 pt http://www.redalyc.org/revista.oa?id=488 Revista Árvore application/pdf Universidade Federal de Viçosa Revista Árvore (Brasil) Num.6 Vol.34 |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_48818716002 |
| institution | Redalyc |
| language | pt |
| publishDate | 2010 |
| publisher | Universidade Federal de Viçosa |
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| topic | Agrociencias do campo) Anacardium humilis (caju Annona crassiflora (araticum) Eugenia dysenterica (cagaita) |
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