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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires
2006
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540115 |
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| _version_ | 1866815571280003072 |
|---|---|
| author | Sandra Soares Melo |
| author_facet | Sandra Soares Melo |
| contents | Optimização da detecção do polimorfismo Ala 677 – Val do gene que codifica a metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) Sandra Soares Melo Carlos Leonardo Maccagnan Pinheiro Besen Fabiano Sansão Iriane Eger Mangrich Darlene Camati Persuhn Biología PCR C677T metilenotetrahidrofolato redutase A mutação (C677T) no gene que codifica a enzima metilenotetrahidrofolatoredutase (MTHFR) tem sido associada a hiperhomocisteinemia e possivelmenteao risco elevado para doenças vasculares. O objetivo deste trabalho foiotimizar sua detecção por PCR para faciliar estudos populacionais. Foramtestadas metodologias alternativas de purificação do DNA genômico humanoe os resultados obtidos permitiram padronizar uma técnica com redução dereagentes para extração de DNA por precipitação com NaCl. Foram realizadosexperimentos variando a concentração dos componentes da reação de PCRque permitiram definir que reações contendo metade do volume inicial dedeoxinucleotídeos e iniciadores (primers), assim como 0,5U de Taq DNApolimerase produzem essencialmente a mesma quantidade de amplificadoque a reação anteriormente utilizada. Testou-se ainda, a redução do volumeda reação de PCR com objetivo de utilizar o produto de amplificação diretamentepara digestão com a enzima HinfI, evitando assim, etapas de pipetagemque acarretam em risco de contaminação. Obteve-se sucesso com 15mL de volume final; que permitiu a utilização do sistema de PCR completopara digestão do produto amplificado. A importância deste estudo pode serjustificada pela significância que as doenças vasculares apresentam em termospopulacionais e por este polimorfismo estar potencialmente relacionadocom o risco de DAC (doença artério-coronariana) precoce. 2006 artículo científico 0325-2957 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540115 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=535 Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana application/pdf Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana (Argentina) Num.1 Vol.40 |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_53540115 |
| language | es |
| publishDate | 2006 |
| publisher | Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires |
| spellingShingle | Optimização da detecção do polimorfismo Ala 677 – Val do gene que codifica a metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) Sandra Soares Melo Biología PCR C677T metilenotetrahidrofolato redutase Optimização da detecção do polimorfismo Ala 677 – Val do gene que codifica a metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) Sandra Soares Melo Carlos Leonardo Maccagnan Pinheiro Besen Fabiano Sansão Iriane Eger Mangrich Darlene Camati Persuhn Biología PCR C677T metilenotetrahidrofolato redutase A mutação (C677T) no gene que codifica a enzima metilenotetrahidrofolatoredutase (MTHFR) tem sido associada a hiperhomocisteinemia e possivelmenteao risco elevado para doenças vasculares. O objetivo deste trabalho foiotimizar sua detecção por PCR para faciliar estudos populacionais. Foramtestadas metodologias alternativas de purificação do DNA genômico humanoe os resultados obtidos permitiram padronizar uma técnica com redução dereagentes para extração de DNA por precipitação com NaCl. Foram realizadosexperimentos variando a concentração dos componentes da reação de PCRque permitiram definir que reações contendo metade do volume inicial dedeoxinucleotídeos e iniciadores (primers), assim como 0,5U de Taq DNApolimerase produzem essencialmente a mesma quantidade de amplificadoque a reação anteriormente utilizada. Testou-se ainda, a redução do volumeda reação de PCR com objetivo de utilizar o produto de amplificação diretamentepara digestão com a enzima HinfI, evitando assim, etapas de pipetagemque acarretam em risco de contaminação. Obteve-se sucesso com 15mL de volume final; que permitiu a utilização do sistema de PCR completopara digestão do produto amplificado. A importância deste estudo pode serjustificada pela significância que as doenças vasculares apresentam em termospopulacionais e por este polimorfismo estar potencialmente relacionadocom o risco de DAC (doença artério-coronariana) precoce. 2006 artículo científico 0325-2957 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540115 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=535 Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana application/pdf Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana (Argentina) Num.1 Vol.40 |
| title | Optimização da detecção do polimorfismo Ala 677 – Val do gene que codifica a metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) |
| topic | Biología PCR C677T metilenotetrahidrofolato redutase |
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