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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires
2006
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540407 |
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| _version_ | 1866814330619559936 |
|---|---|
| author | María Mercedes Castañón |
| author_facet | María Mercedes Castañón |
| contents | Aplicación de un método de electroforesis capilar al estudio de la glicosilación de albúmina in vitro María Mercedes Castañón Noemí Steyerthal Juan Miguel Castagnino Graciela Garbossa Biología fluorometría aminoguanidina albúmina sérica bovina albúmina sérica humana electroforesis capilar Los azúcares reductores como la glucosa pueden reaccionar no enzimáticamentecon los grupos amino libres de las proteínas generando productos deglicosilación avanzados (AGEs). El objetivo del presente trabajo fue desarrollarun método de electroforesis capilar de zona (ECZ) para estudiar albúminaglicosilada in vitro. Se realizaron incubaciones de albúmina bovina y suerohumano con glucosa (0,5 M) durante 12, 24 y 60 días. Como inhibidor de laglicosilación se utilizó aminoguanidina (AG; 0,5 M). Al finalizar la incubaciónla albúmina sérica fue separada por precipitación fraccionada y redisuelta enbuffer fosfato-salino. La detección de AGEs fluorescentes (λexcitación=338 nm,λemisión=442 nm) aumentó proporcionalmente con el tiempo de incubacióny fue completamente inhibida en presencia de AG. Por ECZ (buffer ácido bórico350 mM; pH 9,9; capilar de sílica 50 cm x 50 µm; 25 kV; 90 µA;20 °C; λdet=200 nm) se observó prolongación de los tiempos de migración yensanchamiento de los picos con el aumento del tiempo de incubación. Estosparámetros se redujeron sólo parcialmente en presencia de AG. En conclusión,la ECZ presenta mayor sensibilidad para discriminar estadios intermediosdel proceso de glicosilación, resultando un método complementario alanálisis por fluorometría utilizado para el estudio de AGEs. 2006 artículo científico 0325-2957 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540407 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=535 Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana application/pdf Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana (Argentina) Num.4 Vol.40 |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_53540407 |
| language | es |
| publishDate | 2006 |
| publisher | Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires |
| spellingShingle | Aplicación de un método de electroforesis capilar al estudio de la glicosilación de albúmina in vitro María Mercedes Castañón Biología fluorometría aminoguanidina albúmina sérica bovina albúmina sérica humana electroforesis capilar Aplicación de un método de electroforesis capilar al estudio de la glicosilación de albúmina in vitro María Mercedes Castañón Noemí Steyerthal Juan Miguel Castagnino Graciela Garbossa Biología fluorometría aminoguanidina albúmina sérica bovina albúmina sérica humana electroforesis capilar Los azúcares reductores como la glucosa pueden reaccionar no enzimáticamentecon los grupos amino libres de las proteínas generando productos deglicosilación avanzados (AGEs). El objetivo del presente trabajo fue desarrollarun método de electroforesis capilar de zona (ECZ) para estudiar albúminaglicosilada in vitro. Se realizaron incubaciones de albúmina bovina y suerohumano con glucosa (0,5 M) durante 12, 24 y 60 días. Como inhibidor de laglicosilación se utilizó aminoguanidina (AG; 0,5 M). Al finalizar la incubaciónla albúmina sérica fue separada por precipitación fraccionada y redisuelta enbuffer fosfato-salino. La detección de AGEs fluorescentes (λexcitación=338 nm,λemisión=442 nm) aumentó proporcionalmente con el tiempo de incubacióny fue completamente inhibida en presencia de AG. Por ECZ (buffer ácido bórico350 mM; pH 9,9; capilar de sílica 50 cm x 50 µm; 25 kV; 90 µA;20 °C; λdet=200 nm) se observó prolongación de los tiempos de migración yensanchamiento de los picos con el aumento del tiempo de incubación. Estosparámetros se redujeron sólo parcialmente en presencia de AG. En conclusión,la ECZ presenta mayor sensibilidad para discriminar estadios intermediosdel proceso de glicosilación, resultando un método complementario alanálisis por fluorometría utilizado para el estudio de AGEs. 2006 artículo científico 0325-2957 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540407 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=535 Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana application/pdf Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana (Argentina) Num.4 Vol.40 |
| title | Aplicación de un método de electroforesis capilar al estudio de la glicosilación de albúmina in vitro |
| topic | Biología fluorometría aminoguanidina albúmina sérica bovina albúmina sérica humana electroforesis capilar |
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