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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires
2006
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540413 |
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| _version_ | 1866558325346271232 |
|---|---|
| author | Gustavo Sobarzo Aguayo |
| author_facet | Gustavo Sobarzo Aguayo |
| contents | Detección de contaminación por Mollicutes en cultivos celulares mediante amplificación del gen 16S rARN Gustavo Sobarzo Aguayo María Angélica Martínez Tagle María Cristina Martínez Torrens Luis Fidel Avendaño Carvajal Roberto Vidal Alvarez Biología Mollicutes contaminación cultivos celulares La contaminación de los cultivos celulares por Mollicutes es un hecho frecuenteen los laboratorios, reportándose hasta un 80% de cultivos contaminados,lo que resulta en ensayos experimentales poco confiables y en productosbiológicos poco seguros. Los objetivos del presente estudio fueron:estimar la frecuencia de micoplasmas como contaminantes de cultivos celularesy analizar la eficiencia de un ensayo de PCR que emplea como ADNblanco al gen 16S rARN de los Mollicutes. Se estudiaron 39 cultivos celulares,representativos de las líneas celulares más utilizadas y 17 cultivos celularesprimarios, recibidos para análisis de contaminación, entre julio y diciembrede 2005. Se detectaron micoplasmas en 18/39 (46,2%) cultivos delíneas celulares, mientras que no se detectaron micoplasmas en los cultivoscelulares primarios. El análisis mediante HpaII del espacio intergénico 16S-23S rARN de 6 cultivos positivos determinó dos patrones de restricción. Lasecuenciación del ADN de dos amplicones identificó a Mycoplasma hyorhinisy a Mycoplasma salivarium como micoplasmas contaminantes. La sensibilidadanalítica de la PCR, determinada a partir de diluciones de un cultivo deMycoplasma hominis fue 0,01 u.c.c./mL (unidades cambiadoras de color pormL), mientras que su especificidad analítica fue 100%. Los resultados de esteestudio confirman la importancia de los micoplasmas como contaminantesde cultivos celulares y sugieren que la PCR dirigida al gen 16S rARN esun procedimiento útil para el diagnóstico de estos microorganismos. 2006 artículo científico 0325-2957 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540413 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=535 Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana application/pdf Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana (Argentina) Num.4 Vol.40 |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_53540413 |
| language | es |
| publishDate | 2006 |
| publisher | Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires |
| spellingShingle | Detección de contaminación por Mollicutes en cultivos celulares mediante amplificación del gen 16S rARN Gustavo Sobarzo Aguayo Biología Mollicutes contaminación cultivos celulares Detección de contaminación por Mollicutes en cultivos celulares mediante amplificación del gen 16S rARN Gustavo Sobarzo Aguayo María Angélica Martínez Tagle María Cristina Martínez Torrens Luis Fidel Avendaño Carvajal Roberto Vidal Alvarez Biología Mollicutes contaminación cultivos celulares La contaminación de los cultivos celulares por Mollicutes es un hecho frecuenteen los laboratorios, reportándose hasta un 80% de cultivos contaminados,lo que resulta en ensayos experimentales poco confiables y en productosbiológicos poco seguros. Los objetivos del presente estudio fueron:estimar la frecuencia de micoplasmas como contaminantes de cultivos celularesy analizar la eficiencia de un ensayo de PCR que emplea como ADNblanco al gen 16S rARN de los Mollicutes. Se estudiaron 39 cultivos celulares,representativos de las líneas celulares más utilizadas y 17 cultivos celularesprimarios, recibidos para análisis de contaminación, entre julio y diciembrede 2005. Se detectaron micoplasmas en 18/39 (46,2%) cultivos delíneas celulares, mientras que no se detectaron micoplasmas en los cultivoscelulares primarios. El análisis mediante HpaII del espacio intergénico 16S-23S rARN de 6 cultivos positivos determinó dos patrones de restricción. Lasecuenciación del ADN de dos amplicones identificó a Mycoplasma hyorhinisy a Mycoplasma salivarium como micoplasmas contaminantes. La sensibilidadanalítica de la PCR, determinada a partir de diluciones de un cultivo deMycoplasma hominis fue 0,01 u.c.c./mL (unidades cambiadoras de color pormL), mientras que su especificidad analítica fue 100%. Los resultados de esteestudio confirman la importancia de los micoplasmas como contaminantesde cultivos celulares y sugieren que la PCR dirigida al gen 16S rARN esun procedimiento útil para el diagnóstico de estos microorganismos. 2006 artículo científico 0325-2957 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53540413 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=535 Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana application/pdf Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana (Argentina) Num.4 Vol.40 |
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| topic | Biología Mollicutes contaminación cultivos celulares |
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