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Aproximaciones de bioquímica clásica al estudio de la relación entre la estructura y la función de la rodopsina ¥

Fuente: Redalyc

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Main Author:	Carolina Moller
Format:	Artículo científico
Language:	es
Published:	Sociedad Venezolana de Farmacología Clínica y Terapéutica 2008
Subjects:	Medicina Rodopsina proceso visual fotointermediarios entrecruzamiento químico dimerización de receptores
Online Access:	Acceder al recurso
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author	Carolina Moller
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contents	Aproximaciones de bioquímica clásica al estudio de la relación entre la estructura y la función de la rodopsina ¥ Carolina Moller Deisy Perdomo José Bubis Rafael Medina Medicina Rodopsina proceso visual fotointermediarios entrecruzamiento químico dimerización de receptores La proteína fotorreceptora rodopsina (R) fue extraída de los segmentos externos de los bastoncillos de retinas bovinas con el detergente n-dodecil β-D-maltósido (DM) y purificada a homogeneidad mediante cromatografía de afinidad. El entrecruzamiento químico de la R y de la rodopsina fotoactivada (R) con los agentes bifuncionales sulfo succinimidilo 4-(Nmaleimidometilo) ciclohexano-1-carboxilato (sulfo-SMCC) o m-maleimidobenzoilo-N- hidroxisuccinimido ester, sugirieron la naturaleza oligomérica de la proteína fotorreceptora. La caracterización de los parámetroshidrodinámicos de la R y la R en presencia de 0.1% DM, mediante cromatografía de exclusión molecular y sedimentación sobre gradientes de sacarosa, permitió estimar los tamaños de los complejos R:DM y R: DM. Los resultados concuerdan con una estructura cuaternaria dimérica tanto para la R como para la R. La R entrecruzada con sulfo-SMCC, en presencia de luz, fue estabilizada en un fotointermediario que absorbió a ~ 470 nm. Experimentos de proteólisis con termolísina sobre los dímeros nativos de R y sobre los monómeros de R generados por medio del uso de altas concentraciones de DM, complementados con estudios de modelaje basados en la estructura cristalina reportada de la proteína, sugirieron que el reactivo sulfo-SMCC generó un entrecruzamiento intramolecular entre la Cys140 y la Lys248 de la R, el cual posiblemente es el responsable de la incapacidad de la proteína de sufrir el cambio conformacional requerido para llegar a su estado fotoactivado. 2008 artículo científico 0798-0264 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=55927103 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=559 Archivos Venezolanos de Farmacología y Terapéutica application/pdf Sociedad Venezolana de Farmacología Clínica y Terapéutica Archivos Venezolanos de Farmacología y Terapéutica (República Bolivariana de Venezuela) Num.1 Vol.27
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