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Aislamiento y purificación de tirotropina humana a partir de glándulas hipofisiarias para su uso en el inmunodiagnóstico

Fuente: Redalyc

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Detalles Bibliográficos
Autor principal:	Lilian Pérez-López
Formato:	Artículo científico
Lenguaje:	es
Publicado:	Asociación Mexicana de Bioquímica Clínica, A.C. 2008
Materias:	Medicina TSH Tirotropina aislamiento purificación hormonas glicoproteicas
Acceso en línea:	Acceder al recurso
Etiquetas:	Agregar Etiqueta Sin Etiquetas, Sea el primero en etiquetar este registro!

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author	Lilian Pérez-López
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contents	Aislamiento y purificación de tirotropina humana a partir de glándulas hipofisiarias para su uso en el inmunodiagnóstico Lilian Pérez-López Liliana Hernández-Pérez Antonio Melchor-Rodríguez Orlando Zulueta-Rodríguez Raquel López-Cisnero Medicina TSH Tirotropina aislamiento purificación hormonas glicoproteicas En este trabajo se describe un procedimiento de purificación de TSH humana (hTSH) a partir de glándulas hipofisiarias mediante cromatografía de inmunoafinidad, empleando un anticuerpo policlonal específico contra la cadena beta de la hormona. Las glándulas se secaron con acetona y se pulverizaron empleando un molino. La extracción de TSH se realizó con la mezcla acetato de amonio:etanol. El extracto resultante se precipitó con etanol al 87% (v/v). El precipitado obtenido se resuspendió con éter dietílico y se dejó secar por evaporación. El polvo fue resuspendido en solución salinafosfato pH 7.4, clarificado y aplicado a una columna empaquetada con Sepharose-IgG de carnero anti ¿TSH. La elución de la hormona se realizó con glicina 0.2 mol/L pH 2.8. La TSH obtenida se liofilizó y se conservó a -20 °C. La pureza se evaluó mediante PAGE-SDS tomando como referencia TSH comercial. La TSH purificada mostró una masa molecular de 54.1 kDa y una pureza de 93.87%. La caracterización de las subunidades se realizó mediante PAGE-SDS desnaturalizante, obteniéndose dos bandas correspondientes a las subunidades a y B, con masas moleculares de 16.8 kDa y 20.2 kDa, respectivamente. El rendimiento y el grado de purificación fueron 43.7 y 41.7%, respectivamente. La actividad específica de la TSH purificada fue de 21.1 UI/mg. El procedimiento de purificación diseñado es sencillo, reproducible y permite obtener la hormona con características fisicoquímicas y biológicas similares a la hormona comercial, indicada para su uso como inmunógeno o estándar de calibración. 2008 artículo científico 0185-5751 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57611801002 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=576 Bioquimia application/pdf Asociación Mexicana de Bioquímica Clínica, A.C. Bioquimia (México) Num.4 Vol.33
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