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| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Sprache: | es |
| Veröffentlicht: |
Universidad Nacional de Colombia
2008
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77610110 |
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| _version_ | 1866567618044887040 |
|---|---|
| author | Ana Cristina Campal Espinosa |
| author_facet | Ana Cristina Campal Espinosa |
| contents | Procedimiento general para purificar a pequeña escala las fimbrias expresadas por cepas porcinas de Escherichia coli enterotoxigénicas Ana Cristina Campal Espinosa Jesús Arturo Junco Barranco Niurka Onexis Arteaga Moré María Dolores Castro Santana Sonia Casas Suárez Licette León Barreras Guillermo Barreto Arguilagos Guillermo Pardo Cardoso Biología CFA Minca fimbria medio mínimo Escherichia coli enterotoxigénica La fimbriación en cepas de Escherichia coli enterotoxigénicas es un proceso complejo controlado por varios mecanismos: reguladores globales y locales de la transcripción y el control postranscripcional, e influenciadopor factores como velocidad de crecimiento bacteriano, composición del medio de cultivo, temperatura y pH, entre otros. Estas características propician que la expresión fimbrial se pierda con alta frecuencia. De allí que se requieran procedimientos de cultivo que favorezcan el mantenimiento de dicha expresión. Con ese objetivo, en el trabajo la población bacteriana fimbriada se enriqueció mediante cultivo estático en caldo Mueller-Hinton. Luego, la expresión fimbrial se mantuvo mediante el crecimiento en forma consecutivaen agar CFA, y el caldo Minca o Mínimo, según el tipo fimbrial, en los que se alcanzó la máxima expresión a las 4-5h de cultivo. Las fimbrias se extrajeron mediante tratamiento térmico y se precipitaron con sulfato de amonio al 40%. La purificación se realizó mediante exclusión molecular y el tratamiento con deoxicolato de sodio. La metodología propuesta integra procedimientos conocidos en un proceso simple y reproducible para la obtención de las fimbrias F4, F5, F6 y F41 en cantidades suficientes para su posterior uso en la generación de anticuerpos, el desarrollo de inmunoensayos y otros estudios a escala de laboratorio,que necesiten de preparaciones con una pureza superior al 80%, que mantengan su estructura nativa. 2008 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77610110 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.1 Vol.X |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_77610110 |
| language | es |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Universidad Nacional de Colombia |
| spellingShingle | Procedimiento general para purificar a pequeña escala las fimbrias expresadas por cepas porcinas de Escherichia coli enterotoxigénicas Ana Cristina Campal Espinosa Biología CFA Minca fimbria medio mínimo Escherichia coli enterotoxigénica Procedimiento general para purificar a pequeña escala las fimbrias expresadas por cepas porcinas de Escherichia coli enterotoxigénicas Ana Cristina Campal Espinosa Jesús Arturo Junco Barranco Niurka Onexis Arteaga Moré María Dolores Castro Santana Sonia Casas Suárez Licette León Barreras Guillermo Barreto Arguilagos Guillermo Pardo Cardoso Biología CFA Minca fimbria medio mínimo Escherichia coli enterotoxigénica La fimbriación en cepas de Escherichia coli enterotoxigénicas es un proceso complejo controlado por varios mecanismos: reguladores globales y locales de la transcripción y el control postranscripcional, e influenciadopor factores como velocidad de crecimiento bacteriano, composición del medio de cultivo, temperatura y pH, entre otros. Estas características propician que la expresión fimbrial se pierda con alta frecuencia. De allí que se requieran procedimientos de cultivo que favorezcan el mantenimiento de dicha expresión. Con ese objetivo, en el trabajo la población bacteriana fimbriada se enriqueció mediante cultivo estático en caldo Mueller-Hinton. Luego, la expresión fimbrial se mantuvo mediante el crecimiento en forma consecutivaen agar CFA, y el caldo Minca o Mínimo, según el tipo fimbrial, en los que se alcanzó la máxima expresión a las 4-5h de cultivo. Las fimbrias se extrajeron mediante tratamiento térmico y se precipitaron con sulfato de amonio al 40%. La purificación se realizó mediante exclusión molecular y el tratamiento con deoxicolato de sodio. La metodología propuesta integra procedimientos conocidos en un proceso simple y reproducible para la obtención de las fimbrias F4, F5, F6 y F41 en cantidades suficientes para su posterior uso en la generación de anticuerpos, el desarrollo de inmunoensayos y otros estudios a escala de laboratorio,que necesiten de preparaciones con una pureza superior al 80%, que mantengan su estructura nativa. 2008 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77610110 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.1 Vol.X |
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| topic | Biología CFA Minca fimbria medio mínimo Escherichia coli enterotoxigénica |
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