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| Autore principale: | |
|---|---|
| Natura: | Artículo científico |
| Lingua: | es |
| Pubblicazione: |
Universidad Nacional de Colombia
2008
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| Soggetti: | |
| Accesso online: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77610212 |
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Sommario:
- Comparación de dos kits de RT-PCR en la detección de ARNm de dos genes endógenos de papa (Solanum tuberosum spp. Andígena) Milet Zabaleta Vanegas Mary Luz Yaya-Lancheros Alejandro Chaparro-Giraldo Biología RT cox PCR papa actina RT-PCR es una técnica en la que usando ARN mensajero como molde, se obtiene complementario o cADN por transcripción inversa, y luego se amplifica uno de los cADN por PCR, mediante el uso de primers específicos. Esta técnica permite realizar estudios de expresión, a nivel de ARN mensajero. Con el propósito de implementar la técnica en papa (Solanum tuberosum spp. Andígena), se utilizaron plántulas cultivadas in vitro de la variedad Pastusa Suprema. Inicialmente se establecieron las condiciones para la extracción de ARN total usando el kit TRizol® Reagent de Invitrogen, con el que se obtuvieron excelentes resultados. Este ARN se usó como molde para evaluar dos kits: "ONE Step superScript" y "SuperScrip First Strand Syntesis For RT-PCR SS¿ II RT", de Invitrogen. Se usaron primers específicos para dos genes endógenos: cox y actina. El primero es un gen mitocondrial y el segundo es un gen nuclear. Se observaron señales claras y diferenciables de amplificación para cox, utilizando el kit "ONE Step superScript", con un tamaño esperado de 96 pb. Para actina, se observó una señal clara de amplificación de 300 pb, con el kit "SuperScript¿ First Strand Syntesis For RT-PCR SS¿ II RT". 2008 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77610212 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.2 Vol.X