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| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Sprache: | es |
| Veröffentlicht: |
Universidad Nacional de Colombia
2014
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77631180004 |
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| _version_ | 1866811847050526720 |
|---|---|
| author | Diego Fernando Gualtero Escobar |
| author_facet | Diego Fernando Gualtero Escobar |
| contents | Purificación y caracterización de lipopolisacáridos de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83 Diego Fernando Gualtero Escobar Jeimy Paola Porras Gaviria Sebastián Bernau Gutiérrez Diana Marcela Buitrago Ramírez Diana Marcela Castillo Perdomo Gloria Inés Lafaurie Villamil Biología ceto ácido 2 test LAL Endotoxinas cromatografía La purificación de lipopolisacáridos ( LPS ) o endotoxinas y su caracterización es un aspecto esencial para estudios que buscan aclarar el papel de estas biomoléculas de bacterias Gram negativas presentes en la cavidad oral y su relación con enfermedades locales periodontales y sistémicas. Este estudio implementa una metodología para la extracción, purificación y caracterización de LPS a partir de bacteria completa de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83, utilizando técnicas previamente descritas. La extracción cruda de LPS se realizó con fenol-agua caliente; la purificación se realizó con tratamiento enzimático con nucleasas y proteasa, seguido de cromatografía de exclusión por tamaño (Sepha - cryl S-200 HR ) con deoxicolato de sodio como fase móvil. La caracterización de los extractos purificados se realizó por barrido espectrofotométrico, pruebas bioquímicas de electroforesis SDS-PAGE , ensayo Purpald y la prueba cromogénica de LAL . Como control para la identificación y caracterización de los extractos purificados se utilizaron LPS comerciales de Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Rodobacter sphaeroides y Porphyromonas gingivalis . La metodología implementa - da permitió la obtención de LPS de elevada pureza con la identificación de KDO o heptosas, un quimiotipo de LPS-S (liso) para E. corrodens y LPS-SR (semi-rugoso) para P. gingivalis W83 . Ambos LPS purificados mostraron capacidad endotóxica a bajas concentraciones. La metodología implementada en este estudio para la purificación y caracterización de LPS a partir de bacteria completa fue eficiente al compararla con los LPS comerciales. 2014 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77631180004 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.1 Vol.XVI |
| format | Artículo científico |
| id | redalyc_77631180004 |
| language | es |
| publishDate | 2014 |
| publisher | Universidad Nacional de Colombia |
| spellingShingle | Purificación y caracterización de lipopolisacáridos de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83 Diego Fernando Gualtero Escobar Biología ceto ácido 2 test LAL Endotoxinas cromatografía Purificación y caracterización de lipopolisacáridos de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83 Diego Fernando Gualtero Escobar Jeimy Paola Porras Gaviria Sebastián Bernau Gutiérrez Diana Marcela Buitrago Ramírez Diana Marcela Castillo Perdomo Gloria Inés Lafaurie Villamil Biología ceto ácido 2 test LAL Endotoxinas cromatografía La purificación de lipopolisacáridos ( LPS ) o endotoxinas y su caracterización es un aspecto esencial para estudios que buscan aclarar el papel de estas biomoléculas de bacterias Gram negativas presentes en la cavidad oral y su relación con enfermedades locales periodontales y sistémicas. Este estudio implementa una metodología para la extracción, purificación y caracterización de LPS a partir de bacteria completa de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83, utilizando técnicas previamente descritas. La extracción cruda de LPS se realizó con fenol-agua caliente; la purificación se realizó con tratamiento enzimático con nucleasas y proteasa, seguido de cromatografía de exclusión por tamaño (Sepha - cryl S-200 HR ) con deoxicolato de sodio como fase móvil. La caracterización de los extractos purificados se realizó por barrido espectrofotométrico, pruebas bioquímicas de electroforesis SDS-PAGE , ensayo Purpald y la prueba cromogénica de LAL . Como control para la identificación y caracterización de los extractos purificados se utilizaron LPS comerciales de Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Rodobacter sphaeroides y Porphyromonas gingivalis . La metodología implementa - da permitió la obtención de LPS de elevada pureza con la identificación de KDO o heptosas, un quimiotipo de LPS-S (liso) para E. corrodens y LPS-SR (semi-rugoso) para P. gingivalis W83 . Ambos LPS purificados mostraron capacidad endotóxica a bajas concentraciones. La metodología implementada en este estudio para la purificación y caracterización de LPS a partir de bacteria completa fue eficiente al compararla con los LPS comerciales. 2014 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77631180004 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.1 Vol.XVI |
| title | Purificación y caracterización de lipopolisacáridos de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83 |
| topic | Biología ceto ácido 2 test LAL Endotoxinas cromatografía |
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