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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Artículo científico |
| Language: | es |
| Published: |
Universidad Nacional de Colombia
2015
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| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77642873018 |
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Table of Contents:
- Estandarización de un protocolo para Northern blot no radioactivo usado en la detección de pequeños RNA en células Vero Natalia Campillo-Pedroza Juan Pablo Franco Salazar Juan Carlos Gallego- Gómez Biología ethyl sRNAs Sondas LNA Digoxigenina Northern blot no radioactivo El interés en la detección, identificación, y caracterización funcional de los pequeños RNAs no codificantes (sRNAs), ha generado la necesidad de optimizar las metodologías comúnmente usadas en su detección, la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (RT-qPCR) y Northern blot , con el fin de que sean más sensibles y específicas. A pesar de la baja sensibilidad del Northern blot , esta metodología continúa siendo de uso común en la detección de sRNAs porque permite detectar el RNA pequeño así como a sus precursores, razón por la cual se usa como una metodología complementaria en este tipo de investigaciones. En este trabajo se describe la implementación de un nuevo protocolo para Northern blot no radioactivo, con modificaciones dirigidas a mejorar su sensibilidad y especificidad. El diseños de la sonda con la tecnología LNA , el marcaje de esta con Digoxigenina y por último la fijación del RNA a la membrana mediante 1-Ethyl-3-(-3-dimethyla - minopropyl) carboniimide ( EDC ) y finalmente se discuten los fundamentos teóricos de estos cambios. 2015 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77642873018 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.2 Vol.XVII