Cover Image

Aislamiento e identificación de proteínas de unión a una secuencia específica del promotor del gen calmodulina de Plasmodium falciparum

Fuente: Redalyc

Saved in:

Bibliographic Details
Main Author:	Erika L. Yara
Format:	Artículo científico
Language:	es
Published:	Universidad Nacional de Colombia 2003
Subjects:	Biología malaria maquinaria transcripción Plasmodium falciparum factores de transcripción
Online Access:	Acceder al recurso
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!

_version_	1876452807474675712
author	Erika L. Yara
author_facet	Erika L. Yara
contents	Aislamiento e identificación de proteínas de unión a una secuencia específica del promotor del gen calmodulina de Plasmodium falciparum Erika L. Yara María Oria Rojas Biología malaria maquinaria transcripción Plasmodium falciparum factores de transcripción En este trabajo se sigue la búsqueda de la maquinaria transcripcional de Plasmodium falciparum, aislando proteínas de unión a DNA, que podrían contribuir en un futuro a encontrar nuevos blancos terapéuticos. Con este fin se tomó como modelo el gen de calmodulina, utilizando específicamente un fragmento de DNA de 149 pb (PfCAM149) de la región 5 no traducida. Proteínas parcialmente purificadas provenientes del extracto nuclear total del parásito, se usaron para escalar el microsistema de afinidad DNA PfCAM149-biotina- estreptavidina- magnesferas, previamente desarrollado, para capturar aquellas proteínas de unión específica a la secuencia de DNA PfCAM149. El escalamiento permitió reci-clar tres veces la proteína a través de la matriz cromatográfica y determinar cuáles proteínas permanecían unidas al sistema, indicando interacción específica a la secuencia del promotor del gen de calmodulina (PfCAM149); además, condujo a obtener la cantidad de proteína necesaria para secuenciación. Por otra parte, se realizaron ensayos para rastrear la actividad de unión con secuencias consenso para factores de transcripción eucariotes (CREB, OCT1, MIG y GATA), que permitieron elegir una proteína de 54 kDa, cuya posible identidad corresponde al factor de transcripción E4BP4 o secuencias relacionadas. Con este trabajo se superaron problemas de cantidad, se comprobó la especificidad de la unión y se determinó que la proteína de 54 kDa tenía una modificación intrínseca que impidió la secuenciación de su extremo aminoterminal. Los ensayos realizados evidencian que el factor de trascripción CREB, o factores de trans-cripción relacionados forman parte de la maquinaria transcripcional del parásito. 2003 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77650110 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.1 Vol.V
format	Artículo científico
id	redalyc_77650110
institution	Redalyc
language	es
publishDate	2003
publisher	Universidad Nacional de Colombia
spellingShingle	Aislamiento e identificación de proteínas de unión a una secuencia específica del promotor del gen calmodulina de Plasmodium falciparum Erika L. Yara Biología malaria maquinaria transcripción Plasmodium falciparum factores de transcripción Aislamiento e identificación de proteínas de unión a una secuencia específica del promotor del gen calmodulina de Plasmodium falciparum Erika L. Yara María Oria Rojas Biología malaria maquinaria transcripción Plasmodium falciparum factores de transcripción En este trabajo se sigue la búsqueda de la maquinaria transcripcional de Plasmodium falciparum, aislando proteínas de unión a DNA, que podrían contribuir en un futuro a encontrar nuevos blancos terapéuticos. Con este fin se tomó como modelo el gen de calmodulina, utilizando específicamente un fragmento de DNA de 149 pb (PfCAM149) de la región 5 no traducida. Proteínas parcialmente purificadas provenientes del extracto nuclear total del parásito, se usaron para escalar el microsistema de afinidad DNA PfCAM149-biotina- estreptavidina- magnesferas, previamente desarrollado, para capturar aquellas proteínas de unión específica a la secuencia de DNA PfCAM149. El escalamiento permitió reci-clar tres veces la proteína a través de la matriz cromatográfica y determinar cuáles proteínas permanecían unidas al sistema, indicando interacción específica a la secuencia del promotor del gen de calmodulina (PfCAM149); además, condujo a obtener la cantidad de proteína necesaria para secuenciación. Por otra parte, se realizaron ensayos para rastrear la actividad de unión con secuencias consenso para factores de transcripción eucariotes (CREB, OCT1, MIG y GATA), que permitieron elegir una proteína de 54 kDa, cuya posible identidad corresponde al factor de transcripción E4BP4 o secuencias relacionadas. Con este trabajo se superaron problemas de cantidad, se comprobó la especificidad de la unión y se determinó que la proteína de 54 kDa tenía una modificación intrínseca que impidió la secuenciación de su extremo aminoterminal. Los ensayos realizados evidencian que el factor de trascripción CREB, o factores de trans-cripción relacionados forman parte de la maquinaria transcripcional del parásito. 2003 artículo científico 0123-3475 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77650110 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=776 Revista Colombiana de Biotecnología application/pdf Universidad Nacional de Colombia Revista Colombiana de Biotecnología (Colombia) Num.1 Vol.V
title	Aislamiento e identificación de proteínas de unión a una secuencia específica del promotor del gen calmodulina de Plasmodium falciparum
topic	Biología malaria maquinaria transcripción Plasmodium falciparum factores de transcripción
url	https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=77650110