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Definición de las condiciones de temperatura y almacenamiento adecuadas en la detección de ADN de Leishmania por PCR en flebotominos

Fuente: Redalyc

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Détails bibliographiques
Auteur principal:	Olga L. Cabrera
Format:	Artículo científico
Langue:	es
Publié:	Instituto Nacional de Salud 2002
Sujets:	Medicina PCR Lutzomyia Leishmania Chelex 100 preservación
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author	Olga L. Cabrera
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contents	Definición de las condiciones de temperatura y almacenamiento adecuadas en la detección de ADN de Leishmania por PCR en flebotominos Olga L. Cabrera Reinaldo Gutiérrez Leonard E. Munstermann Rocío Cárdenas Cristina Ferro Medicina PCR Lutzomyia Leishmania Chelex 100 preservación Para estudios epidemiológicos y programas de control de las leishmaniasis es importante ladeterminación taxonómica del insecto vector y del agente etiológico causante de estaenfermedad. Por su eficacia y sensibilidad, la utilización de técnicas moleculares, como lareacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha permitido avances en entomología médica. Lametodología tradicional usada para la búsqueda de infección en los flebótomos es un métododispendioso que requiere mucho tiempo y capacitación para emitir un diagnóstico acertado. Enel presente trabajo se evaluaron las condiciones y prácticas adecuadas para el almacenamientode flebótomos con el propósito de aplicar la PCR. Hembras de Lutzomyia longipalpis de lacolonia del Instituto Nacional de Salud se infectaron experimentalmente con una cepa deLeishmania chagasi del valle alto del río Magdalena (Quipile, Cundinamarca). Los insectosinfectados se preservaron en tres soluciones: etanol al 100%, etanol al 70% y en buffer Tris-EDTA (TE); submuestras de cada una se almacenaron a -80 °C, -20 °C y a temperatura ambiente.Para determinar los porcentajes de infección, algunas de las hembras se disecaron para buscarlas formas flageladas al microscopio. La extracción del KADN se realizó con Chelex 100. Para laamplificación se utilizaron los iniciadores OL1 y OL2 de Leishmania con electroforesis en gelesde agarosa al 1%. En cada una de las condiciones descritas se logró la amplificación de unfragmento de »120 pb, correspondiente a Leishmania spp. Estos resultados muestran la ventajade incorporar como técnica de rutina la PCR para detectar flebótomos infectados de zonasendémicas de leishmaniasis visceral. Por costo-efectividad, se concluyó que las muestrasentomológicas para estudios de incriminación vectorial utilizando la PCR, se pueden preservara temperatura ambiente en etanol al 70% 2002 artículo científico 0120-4157 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=84322309 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=843 Biomédica application/pdf Instituto Nacional de Salud Biomédica (Colombia) Num.3 Vol.22
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