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Main Author: Liliana Franco
Format: Artículo científico
Language:es
Published: Universidad de Buenos Aires 2008
Subjects:
Online Access:https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=86370103
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author Liliana Franco
author_facet Liliana Franco
contents El Papel Del Oxido Nitrico En La Tolerancia Oral Liliana Franco Catalina Feledi Ernesto Massouh Química OVA TH1 TH2 ratas óxido nítrico Para estudiar el papel del óxido nítrico en la tolerización oral con bajas dosis de antígeno,preguntamos si existe en los animales tolerizados una polarización preferencial hacia TH1 o TH2 en la respuesta de memoria hacia el antígeno tolerizante oral OVA. Al cabo de 47 días post-desafío subcutáneo (DPI) con OVA adyuvada en Freund completo (AFC), se evalúa cómo se alteró dicho perfil cuando la tolerancia oral fue inducida en presencia o ausencia de Aminoguanidina (AG), un inhibidor selectivo de la iNOS (óxido nítrico sintetasa inducible), que se aplica intraperitonealmente durante la tolerización. Se utilizaron ratas Wistar distribuidas en cuatro grupos experimentales: C, controles no tolerizados ni tratados con AG; CAG, no tolerizados pero tratados con AG, T, los tolerizados oralmente, y TAG, ratas tolerizadas y tratadas con AG. Obtuvimos por ELISA indirecto los títulos séricos de las subclases de Ig anti-OVA (IgG2a: perfil TH1, vs IgG1: perfil TH2) y por ELISA de captura las concentraciones de IL-10 en sobrenadantes de 48 horas de cultivo de esplenocitos estimulados “in vitro” con OVA.Asimismo, medimos la actividad de los macrófagos a través del óxido nítrico (ON) producido por ellos en estos cultivos dosando la concentración nitritos con Griess. Nuestros resultados mostraron que en los animales tolerizados los títulos de IgG2a (TH1) estaban reducidos significativamente, mientras que la concentración de IL-10 en los sobrenadantes de cultivoestaba significativamente aumentada, y los nitritos no diferían de los controles. Por el contrario,las respuestas tipo TH2 eran similares a las de los controles. En los animales tolerizados bajo el efecto de la AG, la tolerización fue menos efectiva, de manera que los títulos de IgG2a eran intermedios: resultaron significativamente mayores que los de las ratas tolerizadas, peromenores que los controles. La respuesta tipo TH2 permaneció sin cambios, similar a los controles. La producción de IL-10 en los cultivos resultó menor que la de ratas tolerizadas, pero similar a la de los controles. Los niveles de nitrito fueron significativamente mayores quelos de controles y tolerizados, indicando que estaba ocurriendo un estimulación efectiva “in vitro”. El estudio de la cinética de los títulos de IgG2a y de IgG1 entre los 20 y 47 dpi en los controles no tratados con AG reveló que si bien en ellos no se registran variaciones significativas del título de IgG1 (TH2), IgG2a (TH1) aumenta significativamente, una respuestatípica al AFC. Pero la respuesta TH1 anti- OVA de los animales CAG (no tolerizados tratados con AG) va aumentando entre los 20 y 47 DPI, y también TH2 crece. Esto parecería indicar que la AG incide en la respuesta sistémica de los controles, aumentando la respuesta TH2, de una manera no relacionada con la tolerización. La relación TH1/TH2 aumentó significativamente con el tiempo en los animales no tratados con AG, pero disminuyó en los que recibieron AG, debido a la incorporación de respuest 2008 artículo científico 1666-7948 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=86370103 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=863 Química Viva application/pdf Universidad de Buenos Aires Química Viva (Argentina) Num.1 Vol.7
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El Papel Del Oxido Nitrico En La Tolerancia Oral Liliana Franco Catalina Feledi Ernesto Massouh Química OVA TH1 TH2 ratas óxido nítrico Para estudiar el papel del óxido nítrico en la tolerización oral con bajas dosis de antígeno,preguntamos si existe en los animales tolerizados una polarización preferencial hacia TH1 o TH2 en la respuesta de memoria hacia el antígeno tolerizante oral OVA. Al cabo de 47 días post-desafío subcutáneo (DPI) con OVA adyuvada en Freund completo (AFC), se evalúa cómo se alteró dicho perfil cuando la tolerancia oral fue inducida en presencia o ausencia de Aminoguanidina (AG), un inhibidor selectivo de la iNOS (óxido nítrico sintetasa inducible), que se aplica intraperitonealmente durante la tolerización. Se utilizaron ratas Wistar distribuidas en cuatro grupos experimentales: C, controles no tolerizados ni tratados con AG; CAG, no tolerizados pero tratados con AG, T, los tolerizados oralmente, y TAG, ratas tolerizadas y tratadas con AG. Obtuvimos por ELISA indirecto los títulos séricos de las subclases de Ig anti-OVA (IgG2a: perfil TH1, vs IgG1: perfil TH2) y por ELISA de captura las concentraciones de IL-10 en sobrenadantes de 48 horas de cultivo de esplenocitos estimulados “in vitro” con OVA.Asimismo, medimos la actividad de los macrófagos a través del óxido nítrico (ON) producido por ellos en estos cultivos dosando la concentración nitritos con Griess. Nuestros resultados mostraron que en los animales tolerizados los títulos de IgG2a (TH1) estaban reducidos significativamente, mientras que la concentración de IL-10 en los sobrenadantes de cultivoestaba significativamente aumentada, y los nitritos no diferían de los controles. Por el contrario,las respuestas tipo TH2 eran similares a las de los controles. En los animales tolerizados bajo el efecto de la AG, la tolerización fue menos efectiva, de manera que los títulos de IgG2a eran intermedios: resultaron significativamente mayores que los de las ratas tolerizadas, peromenores que los controles. La respuesta tipo TH2 permaneció sin cambios, similar a los controles. La producción de IL-10 en los cultivos resultó menor que la de ratas tolerizadas, pero similar a la de los controles. Los niveles de nitrito fueron significativamente mayores quelos de controles y tolerizados, indicando que estaba ocurriendo un estimulación efectiva “in vitro”. El estudio de la cinética de los títulos de IgG2a y de IgG1 entre los 20 y 47 dpi en los controles no tratados con AG reveló que si bien en ellos no se registran variaciones significativas del título de IgG1 (TH2), IgG2a (TH1) aumenta significativamente, una respuestatípica al AFC. Pero la respuesta TH1 anti- OVA de los animales CAG (no tolerizados tratados con AG) va aumentando entre los 20 y 47 DPI, y también TH2 crece. Esto parecería indicar que la AG incide en la respuesta sistémica de los controles, aumentando la respuesta TH2, de una manera no relacionada con la tolerización. La relación TH1/TH2 aumentó significativamente con el tiempo en los animales no tratados con AG, pero disminuyó en los que recibieron AG, debido a la incorporación de respuest 2008 artículo científico 1666-7948 https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=86370103 es http://www.redalyc.org/revista.oa?id=863 Química Viva application/pdf Universidad de Buenos Aires Química Viva (Argentina) Num.1 Vol.7
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